再进行进一步的纯化。重复进行第一步到第五步的循环,
引物合成的具体实验步骤:
脱掉附加在cpg担体上的第一个碱基基基团上的保护基,准备附加下一个新的碱基;
活化新的碱基单体,准备与第一个碱基进行反应;
第二个碱基与第一个碱基发生偶联反应;
将没有反应的第一个碱基的基加帽封死,使其不再进一步参与反应;
将核苷亚磷酸酯氧化成更稳定的核苷磷酸酯。
重复进行第一步到第五步的循环,直至合成完所需的oligo dna序列。
合成结束后,将oligo dna分子从cpg上切下,再进行进一步的纯化。